小干扰RNA（siRNA）是一种人工设计的短双链RNA分子，是RNA干扰（RNAi）技术中的核心工具，能够特异性地降解靶标信使RNA（mRNA），从而实现基因沉默。目前，化学合成法是最常用且高效的siRNA制备方式，它通过固相合成技术精确地合成所需序列的RNA单链，再退火形成双链siRNA。这种方法能快速提供高纯度的定制化siRNA，为研究基因功能、药物靶点筛选及开发新型疗法提供了关键材料。

本公司⽣产的siRNA均为常规化学⽅法合成21-25nt的双链⼩RNA。经HPLC纯化，可直接⽤于细胞转染使⽤。产品剂型为冻⼲粉，产品剂量经过严格测算，以摩尔数标明。

服务优势

独家专利技术设计siRNA，在保证细胞转染效率（≥80%）的前提下，siRNA可达到70%以上的沉默效果；
售后：若经qRT-PCR鉴定，套餐中3对siRNA均未达到70%或以上的沉默效果，如核实为siRNA设计问题，则重新设计并免费合成针对靶基因的另外3对siRNA。特殊物种（除人，大鼠，小鼠以外）及lncRNA除外。

服务流程

接受订单

合成

纯化

质检

分装

质检

发货

客户提供

准确地提供 siRNA 的 19 个核苷酸的靶序列和悬垂的合成物或者需要设计的基因名称和基因序列及要求，（如果是做三保一，需要交由金开瑞设计，客户提供的序列不做保证型套餐）。

最终交付

siRNA 三条各2管（1OD/管，合计2OD），3个对照各1管（1OD），1管DEPC水（1mL），合计10管；
订单基因信息文件；
检测报告；
siRNA使用说明书。

服务说明

siRNA三保一套餐内容	规格	纯化方式
目的基因siRNA oligos	3对(3×2 OD)	HPLC
阴性对照siRNA oligos	1对(1×1 OD)	HPLC
FAM标记阴性对照siRNA oligos	1对(1×1 OD)	HPLC
阳性对照siRNA oligos	1对(1×1 OD)	HPLC
DEPC水	1mL	/

常见问题与解析 (Q&A)

Q：荧光标记的 siRNA 是不是可以作为良好的对照？如何检测荧光标记的 siRNA？

已经有为数不少的实验室研究过荧光标记的 siRNA 的荧光检测结果和 knockdown 效率之间的正相关关系。荧光标记双链是最常用的优化转染条件的方法。可以用流式细胞仪或者荧光共聚焦显微镜检测标记的 siRNA。

Q：siRNA 导入到细胞内选哪种方法？

使用什么样的转染方法，很大程度上取决于您使用的细胞系： 1.贴壁的、易转染的细胞，我们推荐使用 Lipofectamin 2000 或 siRNA Mate 转染试剂。 2.悬浮的或原代的细胞，我们推荐使用电击转化方法；3.电击转化效率仍然很低的细胞，需要选择载体系统。

Q：沉默效果不理想，应该如何处理？

最常见的影响沉默效果的两个原因是：转染效率低和 siRNA 序列设计的效果不理想。如果您初次使用 siRNA 或采用了新的细胞系，并发现沉默效果不佳，我们建议您对转染效率进行检测，并选择优化转染条件。如果您已经对实验转染条件进行优化但是问题依然存在，我们建议您换用另一种转染试剂或是采用其他技术，这也许能提高转染效率。如果已经提高了转染效率但是沉默效果仍然未达到要求，可能是因为siRNA序列设计的效果不理想。

Q：siRNA转染常见注意事项有哪些？如何提高转染成功效率？

1. 无论您用什么转染试剂，转染时尽量不要加血清，血清里面的小分子会与siRNA竞争性进入细胞，会影响转染效率，也有说血清里含有RNA酶，会将siRNA给降解掉。 2. 转染后一般推荐8-12h换液，这时可以加血清与正常培养细胞一样。 3. 转染前应根据细胞种类、生长速度等因素决定转染时的细胞密度。推荐细胞密度在60%-80%时进行转染实验。细胞密度过低将影响检测结果。siRNA会随着细胞增殖降低在细胞内的浓度。例如：转染时细胞密度50%，转染效率达到100%，siRNA的有效率也100%，36h后细胞长满平皿进行检测。最后提的是总RNA沉默效率可能只有50-60%。细胞密度过大，如超过90%，也会影响转染效率且后期细胞会由于密度过大生长情况受到影响无法得到理想实验结果。